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農藥殘留速測儀測定方法
發布時間：[2019-11-20 14:37:55]
薄層酶抑制率法是農藥殘留速測儀測定果蔬農殘的常用方法，牛肝酯酶和胰酵素可用于薄層-酶抑制技術檢測有機氯農藥。它是以抑制酸性或堿性磷酸酯酶為基礎的。如以傘形酮磷酸酯作為基質時，即被酶分解為熒光化合物傘形酮而檢出。紫外光的照射可明顯增加這類農藥的酶抑制能力，且某些有機氯農藥對牛肝酯酶又比胰酶更靈敏些。
此外許多種農藥在生物體外是弱的酶抑制劑，有時需轉化為它們的氧化類同物或強的酶抑制物，以獲得足夠的抑制能力。用于轉化的試劑有：冷的發煙硝酸、稀澳水、澳蒸氣、澳替琥珀酰胺、紫外光、過氧化氫醋酸、過醋酸、間氯過苯甲酸、過氧化氫和氨水、氨蒸氣等。轉化適宜方法的選擇，取決于測定方法、顯色反應的類型和待測農藥的性狀。
研究表明，薄層適當地厚一些，由于為酶與基質的反應提供了比較充分的支持介質的關系，一般容易獲得底色和農藥斑在色澤上的較強反差，推薦的薄層厚度為350-500毫微米；使用酶液的量或濃度偏大，則有效活性質點數目過多，從而使抑制物被酯酶覆蓋，某些基質分子亦被過量部分的酯酶所水解，致使斑點部位部分或全部為有色物質遮掩，因此，酶液的適用量和濃度，通常要根據具體情況，用實驗來調整；同時由于基質與酶的反應，需要適宜的酸度，為此常用一定pH值的緩沖溶液來配制基質液。
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